Приложения
Страница 4

Среда Гамборга-Эвелега

Компоненты питательной среды

Маточный раствор макросолей

Маточный раствор микросолей

Fe-хеллат

CaCl2

Тиамин-HCl

Пиридоксин-HCl

Никотиновая кислота

Мезоинозит

2,4-Д

Сахароза

50 мл/л

1 мл/л

5 мл/л

50 мл/л

10 мг/л

1 мг/л

1 мг/л

100 мг/л

2 мг/л

20 г/л

рН 5,8

Модифицированная питательная среда Мурасиге-Скуга для клубнеобразования у картофеля.

Компоненты питательной среды

Маточный раствор макросолей

Маточный раствор микросолей

Fe-хеллат

CaCl2

Тиамин-HCl

Пиридоксин-HCl

Никотиновая кислота

Аскорбиновая кислота

Кинетин

Сахароза

Агар-агар

50 мл/л

1 мл/л

5 мл/л

50 мл/л

1 мг/л

0,5 мг/л

0,5 мг/л

1 мг/л

0,5 мг/л

50 г/л

7 г/л

рН 5,8-6,0

Приготовление маточных растворов для среды Блейдза.

№ п.п.

Компонент среды

Количество вещества

Маточный раствор макросолей (г на 1 л маточного раствора)

1.

2.

3.

4.

5.

KNO3

KCl

KH2PO4

NH4NO3

MgSO4 . 7H2O

или MgSO4 безводный

20

1,3

6

20

1,44

0,7

6.

Ca(NO3)2 . 4H2O

10,28

Маточный раствор микросолей (мг на 100 мл маточного раствора)

7.

8.

9.

10.

H3BO3

MnSO4 . H2O

или MnSO4 . 5H2O

ZnSO4 . 7H2O

KJ

160

440

627

150

80

11.

FeSO4

Na2 ЭДТА

557

745

Среда Блейдза для каллусогенеза.

Компоненты питательной среды

Маточный раствор макросолей

Маточный раствор микросолей

Fe-хеллат

CaNO3

Тиамин-HCl

Пиридоксин-HCl

Никотиновая кислота

Аскорбиновая кислота

Мезоинозит

2,4-Д

Сахароза

Агар-агар

50 мл/л

1 мл/л

5 мл/л

50 мл/л

0,5 мг/л

0,5 мг/л

1 мг/л

1 мг/л

0,1 г/л

2 мг/л

20 г/л

7 г/л

рН 6,0

Среда Блейдза для соматического эбриогенеза.

Компоненты питательной среды

Маточный раствор макросолей

Маточный раствор микросолей

Fe-хеллат

CaNO3

Тиамин-HCl

Пиридоксин-HCl

Никотиновая кислота

Аскорбиновая кислота

Мезоинозит

ИУК

Кинетин

АБК

Сахароза

Агар-агар

50 мл/л

1 мл/л

2,5 мл/л

50 мл/л

0,5 мг/л

0,5 мг/л

1 мг/л

1 мг/л

0,1 г/л

0,2 мг/л

0,2 мг/л

0,05 мг/л

20 г/л

7 г/л

рН 6,0

Способы стерилизации в биотехнологии

Все работы с культурой клеток и тканей in vitro проводят в стерильных (асептических) условиях в стерильном боксе или ламинар-боксе, стерильными инструментами, в стерильной посуде, на стерильных питательных средах. В случае нарушения стерильности на средах хорошо развиваются микроорганизмы (грибы, бактерии), нарушающие состав среды и подавляющие рост растительных эксплантов.

Чаще всего для стерилизации помещений (боксов для пересадки тканей, культуральных комнат) используют ультрафиолетовое облучение в течение 0,5-2 часов (в зависимости от площади помещения). Работы в облученном помещении начинают через 15-20 минут после отключения бактерицидных ламп, так как под действием ультрафиолетового излучения двухатомный кислород воздуха становится трехатомным озоном – газом, токсичным для человека. Для достижения максимальной стерильности перед обработкой УФ все поверхности тщательно отмываются моющими средствами, водой и растворами хлорсодержащих веществ, поверхности ламинар-бокса обрабатывают 96 % спиртом.

Страницы: 1 2 3 4 5


Также смотрите:

Клеточный цикл
События, происходящие в период от одного клеточного деления до другого, называются клеточным циклом. Фаза митоза цикла охватывает период деления и хромосом, и клеток. После расхождения клеток каждая дочерняя клетка вступает в период повышенной биосинтетической активно ...

Рацион соболя
Соболь относится к всеядным хищникам, или полифагам. Эта всеядность соболя есть приспособление вида к жизни в изменяющейся среде, когда один вид корма уменьшается до предельного минимума, а другие рода кормов имеются в природе в таком количестве, что соболь может запо ...

Получение трансгенных животных
Если вводить ДНК в клетки многоклеточного организма, то результатом трансформации будет изменение свойств лишь небольшого числа клеток, которые приобрели новый ген или гены. Следовательно, для изменения свойств всего организма следует изменять геном половых клеток, ко ...