Генная инженерия. Научно – исследовательские аспекты.
Страница 2

Биология » Достижения и проблемы генной инженерии » Генная инженерия. Научно – исследовательские аспекты.

Широкое распространение нашел метод ферментативного синтеза генов

по механизму обратной транскрипции. Не вдава­ясь в его суть, отметим, что он позволяет синтезировать практи­чески любой ген в присутствии соответствующих иРНК, мето­ды выделения которых достаточно хорошо разработаны.

С его помощью созданы и клонированы в бактериях гены, кодирующие глобины человека, животных, птиц и т. п., интер­ферон человека, который используют для борьбы с вирусными инфекциями, злокачественными опухолями и рядом других за­болеваний.

Однако остается нерешенной проблема стабильности гиб­ридных молекул. Вектор должен обеспечивать стабильное на­следование рекомбинантных ДНК в автономном, реже интег­рированном с хромосомой состоянии, иметь генетические мар­керы для обнаружения трансформированных клеток, содержать сайт узнавания и др. Он используется для получения банка ге­нов, так как клонированные в них большие фрагменты ДНК лег­ко хранить, выделять и анализировать. Создаются специальные векторы и для клонирования рекомбинантных ДНК в клетках животных и растений, при этом в клетках животных ими могут быть некоторые вирусы, а растений — агробактерии на основе специальных плазмид и передаваться клеткам в естественных условиях бактериями.

Схема, используемая в генной инженерии, едина:

1. Обработка кольцевой векторной молекулы рестриктазой с образованием линейной формы ДНК.

2. Формирование гибридной структуры путем слияния ее с фрагментом чужеродной ДНК.

3. Введение гибрида в клетку реципиента.

4. Отбор клонов трансформированных клеток на селектив­ных средах.

5. Доказательство присутствия рекомбинантной ДНК в этих клонах путем ее выделения из клеток, обработки соответству­ющими рестриктазами и анализа образовавшихся фрагментов методом электрофореза.

Известно несколько методов объединения фрагментов ДНК из разных источников, позволяющих включить клонируемую донорную ДНК в состав вектора.

Одним из перспективных методов клеточной инженерии в культуре клеток человека, животного и растения является гиб­ридизация соматических клеток

(Б. Эфрусси и Г. Барски).

В культивируемые клетки млекопитающих или развивающи­еся эмбрионы ДНК вводят методом микроинъекции ДНК в ядро с помощью микроманипулятора.

Развитие методов микрохирургии клеток позволило заменять ядра оплодотворенных яйцеклеток на ядра из соматических кле­ток и в результате получать организм, идентичный тому, чье ядро было перенесено в яйцеклетку.

Создание гибридов высших растений возможно путем слия­ния протопластов и соматической гибридизации растительных клеток.

Все эти методы могут использоваться для конструирования новых форм микроорганизмов, животных и растений, несу­щих гены, детерминирующие желаемые признаки.

Не менее важна генная инженерия как аппарат фундамен­тальных исследований.

Потенциальные возможности генной инженерии в действи­тельности очень велики, и они будут реализовываться.

Страницы: 1 2 


Также смотрите:

Виды пингвинов
Несмотря на исключительную популярность пингвинов, большая часть их видов моряками не различается. Но справедливости ради следует заметить, что это очень даже непростое дело. Самый крупный пингвин - императорский, или Форстера. Он обитает только на побережье Антаркти ...

Рестриктазы
Общепринято термины "рестриктаза", "эндонуклеаза рестрикции" и "сайт специфическая эндодезоксирибонуклеаза" считать синонимами. Все рестрикционные эндонуклеазы бактерий узнают специфические, довольно короткие последовательности ДНК и свя ...

Пульсирующий ритм развития сложных систем
Путь к единению, к интеграции различных частей в целое не является равномерным, постоянным и однонаправленным. Эволюционное восхождение ко все более сложным формам и организациям проходит через ряд циклов распада и интеграции, отпадения от целого и включения в него, т ...